一、无菌环境营造

1. 建筑设计与装修

墙面与地面：细胞房的墙面和地面应采用光滑、无缝隙且易于清洁消毒的材料。例如，墙面可选用环氧彩砂自流平材料，这种材料不仅具备良好的耐化学腐蚀性，还能有效防止灰尘和微生物附着。地面则可采用同质透心 PVC 地板，其防滑性能好，且拼接处密封性强，减少了细菌滋生的空间。

天花板：天花板需平整光洁，建议采用铝合金扣板吊顶，便于拆卸清洁，且能有效避免积尘。同时，吊顶应与墙面紧密连接，不留缝隙，防止微生物进入。

门窗：门应选用气密门，关闭时能确保房间的密封性，减少空气交换带来的污染。窗户可采用双层中空玻璃，既能保证良好的隔热效果，又能防止外部灰尘和微生物进入。窗户与墙体的连接处需做好密封处理，可使用密封胶填充缝隙。

2. 空气净化系统

空气过滤：细胞房需配备高效的空气过滤系统，通常采用初效、中效和高效过滤器三级过滤。初效过滤器可过滤掉粒径大于 5μm 的灰尘颗粒，安装在新风入口处，保护后续设备不受大颗粒污染物的损害。中效过滤器能进一步过滤粒径 1 - 5μm 的颗粒，安装在空调机组的中级过滤段。高效过滤器则能过滤掉粒径 0.3μm 以上的尘埃粒子和细菌，过滤效率可达 99.97%以上，一般安装在送风口处，确保送入细胞房的空气达到无菌要求。

气流组织：合理的气流组织对于维持无菌环境至关重要。常见的气流组织形式有垂直单向流和乱流。垂直单向流能使空气以均匀的速度和方向流动，避免空气产生涡流，有效减少微生物在空气中的停留和扩散，适用于对无菌要求极高的操作区域，如细胞接种和培养区域。乱流则适用于辅助区域，通过多次空气循环，降低空气中的微生物浓度。

空气消毒：除了过滤，定期对空气进行消毒也是维持无菌环境的重要措施。可采用紫外线消毒灯，安装在天花板或墙壁上，定期开启照射，杀灭空气中的微生物。此外，也可使用过氧化氢汽化消毒设备，通过释放过氧化氢气体，对空气和物体表面进行全面消毒，消毒效果更彻底。

3. 人员与物品管理

人员进入：进入细胞房的人员必须严格遵守更衣制度。在进入前，应更换专用的工作服、鞋套，戴上帽子、口罩，确保全身覆盖，避免将外界的微生物带入细胞房。同时，进入前需在风淋室进行风淋，通过高速气流吹去附着在衣物上的灰尘和微生物。

物品进入：所有进入细胞房的物品，包括实验器材、试剂等，都必须经过严格的消毒处理。玻璃器皿可采用干热灭菌法，在 160 - 180℃的高温下灭菌 2 - 3 小时。塑料制品则可采用环氧乙烷灭菌或伽马射线灭菌。对于不耐热的试剂，可采用过滤除菌的方法，通过 0.22μm 孔径的滤膜过滤，去除其中的微生物。